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Nature Biotechnology:如何能使蛋白質測序變得簡單
[ 發(fā)布日期:2023-9-22 8:51:46    閱讀次數(shù):454 ]

科學家們一直在競相創(chuàng)造一種能使蛋白質測序變得簡單的技術。格羅寧根大學的化學生物學教授Giovanni Maglia現(xiàn)在已經(jīng)找到了這個謎中缺失的一塊:一種通過納米孔運輸?shù)鞍踪|的方法,這種方法可以在一個簡單的手持設備上對蛋白質進行測序。

DNA測序是我們理解生命的一場革命,蛋白質測序是下一個圣杯。Maglia解釋說:“DNA基本上是靜態(tài)的。我們細胞中的過程是由蛋白質執(zhí)行的:它們完成了實際的工作。通過了解蛋白質,我們將進一步了解我們的身體是如何工作的。”

把蛋白質拉過洞的問題

目前市場上有一些手持設備可以對DNA進行測序。這些裝置使用納米孔技術:一條DNA鏈被拉過膜上的一個小孔(納米孔),當它們穿過時,DNA鏈上的組成部分序列就可以被“讀取”。

在將同樣的納米孔技術應用于蛋白質方面已經(jīng)取得了一些進展,但還不可能像DNA鏈一樣通過納米孔運輸長蛋白質。“這就像煮熟的意大利面,”瑪格利亞解釋道。“這些長鏈想要被打亂,它們不想被推過這個小洞。”

單鏈DNA也有點像煮熟的意大利面,但它可以被電場拉過,因為DNA本身是帶電的。但是蛋白質的電荷較弱,可以攜帶正電荷或負電荷。“蛋白質和DNA是不同的,”瑪格利亞解釋說,“所以這項技術需要進行調整。”

隨波逐流

為了通過納米孔運輸?shù)鞍踪|,Maglia使用了一種帶電粒子(離子)溶液,這種溶液可以在電場的作用下通過納米孔。當這種情況發(fā)生時,它們會拖動蛋白質。Maglia解釋說:“我們不知道水流是否足夠強大。此外,這些離子想要雙向移動,但通過在納米孔上附著大量電荷,我們能夠使其定向。”

Maglia設計了一個沒有蛋白質的最強流動系統(tǒng)。在與羅馬大學的研究人員的合作中,進行了計算機模擬,揭示了這種流動對蛋白質的力與電場對DNA的力相當。然后,Maglia在一種困難的蛋白質上進行了試驗:一種帶有許多負電荷的蛋白質,這種蛋白質會使它想要朝著與水流相反的方向移動。但即便如此,水流也足以將蛋白質拉過納米孔。Maglia:“在此之前,我們只分析了易粘連的蛋白質。但我們給了自己最難的一種蛋白質作為測試。這招奏效了!“

Maglia說:“這證明了蛋白質測序不再有根本的限制。”Maglia的新公司名為Portal Biotech,他打算將他實驗室的納米孔技術提供給實驗室和醫(yī)生等用戶。有了這項最新的研究成果,我們找到了實現(xiàn)蛋白質測序所需的缺失部分。”

我們?yōu)槭裁匆o蛋白質排序?

DNA就像我們身體的藍圖,而蛋白質就像實際建造的工人。以DNA(指令)為基礎,形成了一系列蛋白質,在我們的身體中執(zhí)行各種功能。僅舉幾個例子,蛋白質負責:

  • 吸收和釋放血液中的氧氣(血紅蛋白)

  • 防御病原體(抗體)

  • 傳遞信號,例如通過神經(jīng)系統(tǒng),但也通過細胞壁(受體)

蛋白質也可能有害。一些例子是來自蛇或蜘蛛的毒液,或一些病原體(如病毒)。

我們對人類基因組(我們的DNA)了解很多。通過研究我們體內的蛋白質,科學家們希望能更深入地了解細胞是如何運作的,以及是什么導致了它們的故障。最終,這將有助于開發(fā)新的、更好的疾病治療方法。

文章標題

Translocation of linearized full-length proteins through an engineered nanopore under opposing electrophoretic force


(文章來源:www.ebiotrade.com/newsf/2023-9/

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